| Immunizálás - Ellenanyag-termelés | 5 |
| Gyakorlatok | 8 |
| Nyulak immunizálása fehérjeantigénekkel | 8 |
| Patkány immunizálása szarvasmarha-vörösvérsejtekkel | 10 |
| Egerek immunizálása haptén-egérszérumalbumin (MSA) konjugátummal | 10 |
| Az immunglobulinok izolálása | |
| IgG preparálása szérumból kisózással, majd ezt követő ioncserélő kromatográfiával | 13 |
| Kisózás | 13 |
| Ioncserélő kromatográfia | 14 |
| A teljes szérum molekulatömeg szerinti frakcionálása | 15 |
| IgM preparálása bórsavas kicsapással | 15 |
| Gyakorlatok | 16 |
| IgG-preparálás normál humán vagy nyulszérumból kisózással, majd ezt követő ioncserélő kromatográfiával | 16 |
| Teljes humán vagy nyulsavó frakcionálása Sephadex G-200 oszlopon, az IgM- és az IgG-tartalmú frakciók elkülönítése | 18 |
| IgM izolálása normál humán és monoklonális IgM-et tartalmazó szérumból bőrsavas kicsapással | 19 |
| Az immunglobulin-fragmentumok izolálása | 21 |
| Az immunglobulinok polipeptidláncainak elválasztása és újra-összekapcsolása | 22 |
| 7S IgM-alegységek előállítása polimer IgM-ből | 23 |
| Az IgG-molekula enzimatikus hasítása | 24 |
| Gyakorlatok | 27 |
| Humán monoklonális IgG H-és L-láncának szétválasztása és az izolált láncok autológ összekapcsolása | 27 |
| Humán monoklonális 19 S IgM enyhe redukciója és 7S IgM-alegységek előállítása | 29 |
| Normál humán vagy nyul IgG pepszines hasítása | 29 |
| Humán monoklonális IgG1 és IgG2 nyelomafehérjék papainos hasítása, Fab- és Fc-fragmentumok előállítása | 32 |
| Humán IgG tripszines hasítása | 34 |
| Az elsődleges antigén-ellenanyag kapcsolodáson alapuló módszerek (jelzéses technikák) | 37 |
| A módszerek alaptípusai | 38 |
| Direkt módszer | 39 |
| Kompetetív módszer | 41 |
| Indirekt módszer | 41 |
| Kettős ellenanyag "sandwich" módszer | 44 |
| A leggyakrabban alkalmazott jelzési módszerek | 46 |
| Szilárd fázisu RIA- és EIA-módszerek | 46 |
| Fehérjék jelölése | 48 |
| Oldott antigén vagy ellenanyag szilárd fázishoz kötése | 49 |
| Sejtek kitapasztása PVC vagy polisztirol alapanyagú szilárd felületre sejtfelszíni antigének RIA- vagy EIA-módszerrel történő kimutatása céljából | 50 |
| Az antigén-ellenanyag kapcsolódáson alapuló lépések | 50 |
| A reagensek feleslegének eltávolítása | 51 |
| A RIA- és az EIA-módszerek értékelése | 51 |
| Farr-módszer | 53 |
| Bakteriofág-inaktivációs vizsgálat | 55 |
| Biotin-avidin vagy haptén-ellenanyag reakción alapuló indirekt jelzéses módszerek | 56 |
| Gyakorlatok | 57 |
| Immunszorbens módszerek | 62 |
| Gyakorlatok | 66 |
| Anti-ovalbumin aktivitásu specifikus ellenanyag izolálása ovalbumint hordozó antigénszorbens-oszlopon | 66 |
| Ismeretlen, több komponensű oldat BSA-tartalmának eltávolítása glutáraldehiddel polimerizált, anti-BSA aktivitású immunszérummal | 71 |
| Egér-IgG-alosztályok izolálása bróm-ciánnal aktivált Sepharose 4B-hez kötött SpA-immunszorbens oszlopon | 72 |
| Az antigén-ellenanyag kapcsolódást követő másodlagos kölcsönhatásokon (szerológiai reakciókon) alapuló módszerek | 74 |
| Precipitáció | 75 |
| Kvantitatív precipitációs görbe felvétele | 76 |
| Agargél közegben végzett precipitációs (immundiffuziós) módszerek | 83 |
| Immunelektroforézis | 84 |
| Elektroimmundiffuzió (Laurell-módszer, rocket-elektroforézis) | 86 |
| Gyakorlatok | 86 |
| Agglutináció | 95 |
| Gyakorlatok | 98 |
| Haptének és szolubilis antigének kapcsolása vörösvérsejtek felületére | 98 |
| Hapténellenes ellenanyagok titerének meghatározása direkt és indirekt passzív hemegglutinációs módszerrel | 101 |
| Az agglutináció gátlás vizsgálata | 102 |
| Inkomplett anti-D aktivitású emberi ellenanyagok kimutatása és az anti-D aktivitású szérum titerének meghatározása indirekt agglutinációval | 102 |
| A komplementrendszer | 104 |
| A komplementrendszer működésének vizsgálata | 104 |
| Összkomploment-titrálás | 105 |
| Az alternatív úton történő komplementaktiválás mérése | 106 |
| A C1q-kötés vizsgálata | 107 |
| A komplementrendszer aktivitásán alapuló módszerek | 108 |
| Komplementkonszumpciós vizsgálat | 108 |
| Komplementfüggő sejtoldódás (citotoxicitás) | 109 |
| Gyakorlatok | 110 |
| Normál emberi szérum összkomploment-tartalmának meghatározása összkomploment-titrálással | 112 |
| Különböző összetételű ovalbumin-antiovalbumin immunkomplexek komplementaktiváló képességének meghatározása komplementkonszumpciós vizsgálattal | 114 |
| Bakteriális lipopoliszacharid (LPS) alternatív úton történő komplementaktiváló képességének mérése | 114 |
| Ovalbumin-antiovalbumin immunkomplexek C1q-követő képességének vizsgálata | 115 |
| Anti-limfocita savó (ALS) titerének meghatározása mikrocitotoxicitási vizsgálattal | 118 |
| Immunkompetens sejtek preparálása | 120 |
| Perifériás mononukleáris sejtek (PMNS) szeparálása vérből | 120 |
| Egérlépsejt-szuszpenzió készítése | 121 |
| Monociták, granulociták és makrofágok eltávolítása sejtszuszpenzióból | 122 |
| A fagocitáló sejtek eltávolítása vaspor segítségével | 123 |
| A monociták és a granulociták eltávolítása kitapasztással | 123 |
| A szeparált sejtek festése és számolása | 123 |
| Az élő sejtek számának meghatározása kristályibolyafestéssel | 124 |
| Az elpusztult sejtek arányának meghatározása tripánkék-festéssel | 124 |
| Limfocitapopulációk és -szubpopulációk szeparálása | 126 |
| Egér T- és B-limfociták szeparálása nylonvatta oszlopon | 126 |
| Sejtpopuláció izolálása monolayar-technikával | 127 |
| Monocitapreparálás emberi vérből | 128 |
| Egér hasüregéből származó (peritoneális) makrofágok preparálása | 129 |
| A limfociták sejtfelszíni strukturáinak vizsgálata | 131 |
| Fehérjék jelölése fluoreszcein-izotiocianáttal (FITC) | 132 |
| Sejtfelszíni immunglobulinok (sIg) kimutatása B-sejteken fluoreszcein-izotiocianáttal (FITC) jelölt ellenanyagok segítségével | 134 |
| Direkt fluoreszcens teszt | 135 |
| Indirekt fluroeszcens teszt | 136 |
| Limfocitamembrán-molekulák mobilitásának vizsgálata immunfluoreszcens módszerrel | 136 |
| T-limfociták rozettaképzése birkavörösvérsejtekkel (E-rozetta) | 138 |
| IgG-Fc receptort hordozó sejtek kimutatása ellenanyaggal fedett vörösvérsejtek segítségével (EA-rozetta) | 140 |
| C3-receptort (C3R) hordozó sejtek kimutatása IgM ellenanyaghoz kapcsolódó komplementtel fedett vörösvérsejtek segítségével (EAC-rozetta) | 142 |
| Emberi limfociták HLA-ABC tipizálása limfocita-mikrocitotoxicitás módszerrel | 143 |
| Emberi PMNS-ek Fc-receptorainak szeparálása sejtmembránból | 145 |
| Immunkompetens sejtek funkcionális aktivitásának mérése | 147 |
| Limfociták blasztos transzformációja | 147 |
| Az ellenanyag-termelő sejtek kimutatása | 151 |
| Egérlépsejtek in vitro immunizálása a Michell-Dutton-féle rendszerben | 153 |
| IgM-osztályú anti-szarvasmarha-vörösvérsejt ellenanyag termelés kimutatása direkt plakkképzés módszerrel | 154 |
| Anti-szarvasmarhavörösvérsejt ellenanyagok kimutatása plazmasejtekben intracelluláris fluoreszcencia módszerrel | 155 |
| Szenzitizált T-limfociták által közvetített citrotoxikus reakció | 156 |
| Természetes citrotoxicitás mérése in vitro | 159 |
| Ellenanyag közvetítette citrotoxikus reakció (ADCC) | 160 |
| Emberi monociták és egérből származó peritoneális makrofágok fagocitózisa | 162 |
| Emberi monociták opszonikus (EA) fagocitózisa | 163 |
| Egérből származó peritoneális makrofágok opszonikus (C3bR mediálta) fagocitózisa | 163 |
| Leukocitamigráció-gátlás vizsgálata | 165 |
| Függelék | 167 |
| Az immunológiai gyakorlatban alkalmazott biokémiai módszerek | 167 |
| Fehérjemeghatározásai módszerek | 170 |
| Kis molekulatömegű anyagok (pl.: sók) eltávolítása dialízissel | 171 |
| Fehérjeoldatok tárolása | 172 |
| Ioncserélő kromatográfia | 172 |
| Gélszűrés | 174 |
| Affinitáskromatográfia | 175 |
| Elektroforézis | 175 |
| Pufferoldatok | 178 |
| Festékek | 183 |
| Limfociták tenyésztéséhez szükséges médiumok | 184 |
| Felhasznált irodalom | 185 |
| Rövidítések | 187 |
Folytatás Microsoft-tal